iptg诱导完的大肠杆菌想做western blot 该如何处理菌体?需要溶菌酶吗?溶菌酶的浓度用何种容积配制?具体操作方法?

诱导大肠杆菌表达时IPTG的量 iptg诱导完的大肠杆菌想做western blot 该如何处理菌体?需要溶菌酶吗?溶菌酶的浓度用何种容积配制?具体操作方法? 做低温诱导需要加iptg吗 用不同的大肠杆菌菌株进行乳糖操纵基因的诱导表达时,对iptg的需求有何不同 用不同的大肠杆菌菌株进行乳糖操纵基因的诱导时,iptg的需求有何不同 IPTG诱导表达后的蛋白上样问题经过IPTG诱导完成后的大肠杆菌BL21（DE3）进行SDS-PAGE蛋白检测诱导表达效果,对菌体该如何处理? IPTG诱导表达的作用原理是什么? 诱导表达时IPTG加的时间太早有影响吗? 我现在用大肠杆菌基因工程菌做发酵实验,每次浊度都很高,用IPTG诱导,但产生的酶活却很低~急以前做过,酶活都挺高,不知啥原因 现在就是没有酶活 大家以前有过这样的经历嘛,求给本人分析下 蛋白质表达一般的条件?本人最近在做蛋白质的诱导表达,我想知道一般的诱导条件是什么?就是诱导时间和加入诱导剂之后的培养时间和条件,以及IPTG的浓度? IPTG诱导BL(DE3)/BL(DE3)plysS蛋白表达的最佳温度,时间,IPTG的浓度,诱导时菌液的最佳浓度. 不用IPTG诱导的重组蛋白能在BL21中表达吗,如果表达经SDS-PAGE电泳后能看到条带吗,.我最近在做重组蛋白的表达,我构建好了一个重组载体,启动子是不用IPTG诱导表达的,我跑了两次电泳结果都没 IPTG的诱导问题我在做诱导是遇到这样一个问题,做了0小时,1,2,3,4,5小时的诱导,可是诱导的蛋白并没有随时间增加而增加,0小时没有,1,2,3,4,5的蛋白量差不多的, 我用BL21（DE3）菌株表达一外源基因,用IPTG诱导,为什么我不加IPTG的对照组也会有目的蛋白的表达呢? 蛋白表达时操作方法对结果有影响吗我做的原核表达,试过低温诱导、低浓度IPTG诱导、不同时间诱导、扩大培养加葡萄糖,但是怎么都没有结果,是因为我操作的原因吗?载体说明书上说在超声 Ni-NTA纯化问题,获得不了纯的目的蛋白!我们用的是导入质粒的大肠杆菌,然后用IPTG诱导,然后将细菌裂解.去掉细菌沉淀,上清过柱,然后用浓度为20mM,40mM,60mM,100mM,150mM,200mM的含有咪唑的洗脱液洗脱 IPTG的作用 BL21中的表达载体为什么要用IPTG诱导