诱导大肠杆菌表达时IPTG的量

来源:学生作业学帮网 编辑:学帮网 时间:2024/05/04 05:49:11

诱导大肠杆菌表达时IPTG的量

50ug/ml,之前做过的

我们用1mM (工作浓度)

诱导大肠杆菌表达时IPTG的量 用不同的大肠杆菌菌株进行乳糖操纵基因的诱导表达时,对iptg的需求有何不同 诱导表达时IPTG加的时间太早有影响吗? IPTG诱导表达的作用原理是什么? IPTG诱导表达后的蛋白上样问题经过IPTG诱导完成后的大肠杆菌BL21(DE3)进行SDS-PAGE蛋白检测诱导表达效果,对菌体该如何处理? 用不同的大肠杆菌菌株进行乳糖操纵基因的诱导时,iptg的需求有何不同 IPTG诱导BL(DE3)/BL(DE3)plysS蛋白表达的最佳温度,时间,IPTG的浓度,诱导时菌液的最佳浓度. IPTG的浓度换算问题生物中加样量如何计算?如诱导细菌表达时加IPTG至终浓度1mmol/L,如果菌液是5ml,那么加入IPTG的体积是5ul,那么此时IPTG配制的浓度是多少,才能这样加入正好是5ul呢? 我用BL21(DE3)菌株表达一外源基因,用IPTG诱导,为什么我不加IPTG的对照组也会有目的蛋白的表达呢? BL21中的表达载体为什么要用IPTG诱导 iptg诱导完的大肠杆菌想做western blot 该如何处理菌体?需要溶菌酶吗?溶菌酶的浓度用何种容积配制?具体操作方法? 蛋白质表达一般的条件?本人最近在做蛋白质的诱导表达,我想知道一般的诱导条件是什么?就是诱导时间和加入诱导剂之后的培养时间和条件,以及IPTG的浓度? 蛋白表达时操作方法对结果有影响吗我做的原核表达,试过低温诱导、低浓度IPTG诱导、不同时间诱导、扩大培养加葡萄糖,但是怎么都没有结果,是因为我操作的原因吗?载体说明书上说在超声 不用iptg诱导,蛋白会表达吗我做原核表达,载体为pet30a,转到BL21中,没有加入IPTG的菌液和加入IPTG 的菌液跑SDS-PAGE,在预测蛋白大小处均有蛋白表达,不知道什么原因为了确定是否为我的目的蛋白, 不用IPTG诱导的重组蛋白能在BL21中表达吗,如果表达经SDS-PAGE电泳后能看到条带吗,.我最近在做重组蛋白的表达,我构建好了一个重组载体,启动子是不用IPTG诱导表达的,我跑了两次电泳结果都没 为什么用IPTG诱导蛋白没表达?双酶切及PCR验证目的片段连到表达载体pET28a上了(所用的内切酶是BamH1,Hind111).重组质粒转化BL21,试了不同的IPTG浓度,诱导温度,就是没蛋白表达.后来重组质粒转化JM10 IPTG的诱导问题我在做诱导是遇到这样一个问题,做了0小时,1,2,3,4,5小时的诱导,可是诱导的蛋白并没有随时间增加而增加,0小时没有,1,2,3,4,5的蛋白量差不多的, 做低温诱导需要加iptg吗