透析过的高免血清进行SDS-PAGE电泳,跑出来的电泳条带应该是怎样的?血清里主要是IgG,我查了,r球蛋白大小约为150kDa,那么跑出来的电泳应该是多大的条带呢?我看有的人说是重链(50kDa)和轻链(25k
来源:学生作业学帮网 编辑:学帮网 时间:2024/05/26 18:36:01
透析过的高免血清进行SDS-PAGE电泳,跑出来的电泳条带应该是怎样的?
血清里主要是IgG,我查了,r球蛋白大小约为150kDa,那么跑出来的电泳应该是多大的条带呢?我看有的人说是重链(50kDa)和轻链(25kDa)两条带,是这样的吗?为什么呢?样品煮或不煮影响大吗?
IgG是血清免疫球蛋白的主要成分,它占总的免疫球蛋白的75%,是初级免疫应答中最持久、最重要的抗体,它仅以单体形式存在.IgG可又含有αβγ三种免疫球蛋白,我们这里的起作用的主要是γ球蛋白,可以通过硫酸铵盐析和半透膜通析的方法纯化,也可以用过柱了.纯化后的蛋白质电泳,一般会在出现50kDa和23.5kDa这二条带,因为Ig分子的基本结构是由四肽链组成的,即由二条相同的分子量较小的轻链(L链)和二条相同的分子量较大的重链(H 链)组成的.L链与H链是由二硫键连接形成一个四肽链分子,称为Ig分子的单体,是构成免疫球蛋白分子的基本结构.在电泳的过程中在聚丙烯酰胺凝胶系统中,加入一定量的十二烷基硫酸钠(SDS),SDS是一种阴离子表面活性剂,加入到电泳系统中能使蛋白质的氢键和疏水键打开,并结合到蛋白质分子上使蛋白质的迁移率只与蛋白质的分子量有关,这样你就可看到两种链了.至于要不煮,我觉得影响不是太大吧,煮了可以使样品和上样缓冲液更好的结合.
透析过的高免血清进行SDS-PAGE电泳,跑出来的电泳条带应该是怎样的?血清里主要是IgG,我查了,r球蛋白大小约为150kDa,那么跑出来的电泳应该是多大的条带呢?我看有的人说是重链(50kDa)和轻链(25k
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