皮肤成纤维细胞和THP-1细胞如何传代

来源：学生作业学帮网编辑：学帮网时间：2024/04/29 11:08:00

皮肤成纤维细胞和THP-1细胞如何传代

博凌科为生物科技-为你养过皮肤成纤维细胞和THP-1细胞.皮肤成纤维细胞是贴壁生长的.THP-1细胞是悬浮的.由于我们实验室养细胞的时间也不是很长,所以也只能说说自己平时的操作了.先说皮肤成纤维细胞.当细胞铺满瓶底,也就是细胞与细胞之间没有间隙时,就可以传代了.一般十天左右传一代.先吸弃旧培养液,用D-Hanks液洗两遍,再加入0.25%的胰酶,加入的量以能覆盖瓶底为准.加入后轻轻摇晃培养瓶使液体覆盖瓶底,然后静置两分钟左右,最好是能在显微镜下观察,当细胞之间出现间隙且有一部分细胞呈现圆形后即可.吸去胰酶,加入含血清培养液,摇晃瓶子使培养液覆盖瓶底就行了.因为血清可以终止胰酶的消化.然后吹打瓶底各处使细胞脱落.再分瓶补加培养液.THP-1细胞的传代就比较简单了.可以有两种传代方法.如果镜下观察细胞状态很好,没有其它杂质即细胞裂解物之类的,就可以采用直接传代法.传代前将细胞培养瓶直立一个半小时使细胞自然下沉.吸弃上层少量培养液约三分之一,将余下的培养液分成两瓶,再分别补加培养液即可.如果镜下观察觉得培养液中有杂质即可采用离心传代法.如果细胞数目较多可以低速离心约600转离心六分钟,细胞可以沉淀下来而且可以去除细胞碎片之类的杂质.如果觉得细胞数目不多比较宝贵,那就提高转速可以1000转离心六分钟,这样细胞损失很少但可能也有些杂质会一起沉淀下来.离心后去除上清液,加入新的培养液吹打浑匀即可分瓶传代了.

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