用DNS法测发酵液中残糖量的具体步骤 哪位能告诉我用DNS法测发酵液中残糖量的具体步骤?急用!十分感谢
来源:学生作业学帮网 编辑:学帮网 时间:2024/05/29 05:38:51
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DNS即二硝基水杨酸法是利用碱性条件下,二硝基水杨酸(DNS)与还原糖发生氧化还原反应,生成3-氨基-5-硝基水杨酸,该产物在煮沸条件下显棕红色,且在一定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比例关系的原理,用比色法测定还原糖含量的.因其显色的深浅只与糖类游离出还原基团的数量有关,而对还原糖的种类没有选择性,故DNS方法适合用在多糖(如纤维素、半纤维素和淀粉等)水解产生的多种还原糖体系中.
将6.3克DNS和262ml 2mol/L氢氧化钠,加到500ml含有182克酒石酸钾钠的热水溶液中,再加上5克重苯酚和5克亚硫酸钠,搅拌溶解,冷却后加水定容到1000ml,即制成3,5-二硝基水杨酸试剂,贮于棕色瓶中备用.
编辑本段葡萄糖标准曲线的绘制
别取葡萄糖标准液(1mg/ml)0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml于25 ml试管中,分别准确加入DNS试剂2ml,加9ml蒸馏水,沸水浴加热3min,流水冷却,定容.在540nm波长下测定吸光度.
编辑本段样品的测定
样品液适当稀释,使糖浓度为0.1-1.0mg/ml,取稀释后的糖液1.0ml于15ml刻度试管中,加DNS试剂2.0ml,沸水煮沸2min,冷却后用水补足到15ml刻度,在540nm波长下测定光密度.从标准曲线查出葡萄糖mg/ml数.求出样品中糖含量.
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