提取RNA反转录测序的问题小弟要提取RNA做反转录对抗一种酶的基因进行测序,因为是新手,以前没有接触过此类实验,求从提取RNA开始到测序的实验步骤,越详细越好,先谢过!

来源:学生作业学帮网 编辑:学帮网 时间:2024/04/28 17:13:01

提取RNA反转录测序的问题
小弟要提取RNA做反转录对抗一种酶的基因进行测序,因为是新手,以前没有接触过此类实验,求从提取RNA开始到测序的实验步骤,越详细越好,先谢过!

博凌科为-为你如果是使用试剂盒的话就可以按照实际和的步骤操作,一般的步骤是取材(液氮保存)-提取RNA-使用反转录引物(带有PolyA)合成第一链CDNA-去除RNA-合成第二链cDNA-在第二链cDNA上加上一段序列-然后用与第二链加位序列互补的引物和带有PolyA为的第一链引物进行大量的反转录--酵母双杂-找出目的基因-克隆基因-测序

提取RNA反转录测序的问题小弟要提取RNA做反转录对抗一种酶的基因进行测序,因为是新手,以前没有接触过此类实验,求从提取RNA开始到测序的实验步骤,越详细越好,先谢过! RNA的提取和反转录的实验步骤? 提取得总RNA有蛋白质污染会影响反转录的CDNA的浓度吗 细胞RNA提取之后,如何定量?10*6细胞提取到了50uL的RNA溶液,下一步反转录需要2ugRNA,如何确定加入RNA的体积? 实时定量PCR试剂盒选那种好?还有、rna提取的试剂盒,反转录试剂盒……做鱼的 在研究基因突变的时候,直接提取DNA和提取RNA反转录为cDNA进行分析有什么区别?分别在什么条件下使用这两种方法呢? RNA提取的时候要注意哪些问题? 我提取RNA,反转录得到cDNA,我要由此扩增功能基因,请问引物设计时,用查到的mRNA序列,还是用cDNA序列我要克隆一个基因,从NCBI查到该基因近似物种的mRNA(没有查到cDNA).我的路线是先提取RNA,反转录 提取的RNA是哪种RNA 反转录PCR和荧光定量PCR很纠结的问题.我想做一个基因的表达量定量.之前认为是先提取RNA,然后反转录,然后做荧光定量.现在发现貌似反转录PCR也是可以做定量的,请问是不是这样?这两个怎么都 肿瘤细胞RNA提取不出来?我是想提取RNA,然后在反转录,最后做荧光定量PCR.我用的标本是Hep-2喉癌细胞株,试剂盒是Biomiga_EZgeneTM Biozol RNA kit,每次收集50ml培养瓶里面的细胞,但是总是提取不出来RNA, RT-PCR:每天只能提取几份血样本的total RNA,请问我是应该提取完之后直接-80保存还是先反转录再保存?求相对定量PCR的详细流程及需要材料, 请问从RNA提取到反转录再到PCR,这个整个过程称为什么?是RT-PCR(反转录PCR)嘛?如题 兰花根和厡球茎RNA提取做DNase处理反转录后,pcr总是没产物?植物材料兰花根和厡球茎,RNA提取后测浓度和纯度都挺好,做DNase处理后反转录cDNA,之后做PCR,一直都没有产物,荧光定量没结果半定量也 RNA提取中几种有机溶液的配制及保存问题 RNA提取中几种有机溶液的配制及保存问题 RNA的提取方法是什么? 有关RNA提取的问题用TRIZOL提取RNA时,为什么每次都要在冰上孵育一会,常温下不行吗?