在荧光定量PCR中SYBR Green I 为什么结合了DNA才可以发出荧光,等到结合了才能检测到荧光值
来源:学生作业学帮网 编辑:学帮网 时间:2024/05/14 00:49:05
在荧光定量PCR中SYBR Green I 为什么结合了DNA才可以发出荧光,等到结合了才能检测到荧光值
只有在结合后,复合物的分子构型发生变化,可以吸收488nm的光能,然后发出522nm光.不结合,没有分子构型变化,就不能吸收光能.
以前我问过我们老师他说原理和跑电泳是加GVII一样
SYBR Green I 含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与DNA的结合没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中,大约每2-5个碱基插入一个荧光素颜料分子。当染料分子插入后,其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华力与上下碱基相互作用。这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近,导致与DNA结合的染料呈现荧光,其荧光产率比游离溶液中染料有所增加。DNA吸收254nm处的紫外辐...
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SYBR Green I 含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与DNA的结合没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中,大约每2-5个碱基插入一个荧光素颜料分子。当染料分子插入后,其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华力与上下碱基相互作用。这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近,导致与DNA结合的染料呈现荧光,其荧光产率比游离溶液中染料有所增加。DNA吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料,而被结合的染料本身吸收476nm-509nm的光辐射。这两种情况下,被吸收的能量在可见光谱绿色区的520nm处重新发射出来。与双链 DNA 接合的 SYBR Green I 呈现绿色荧光。而单链 DNA 则颜色为橘黄而不是绿色。
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