血球板细胞计数注意事项我是先用台盼蓝染色再进行的计数,但感觉有时在镜下四个大格子中细胞分布不均匀,感觉计数结果误差可能也很大.想求教一下细胞计数时有哪些主要特别关注的点以

来源:学生作业学帮网 编辑:学帮网 时间:2024/04/29 20:44:11

血球板细胞计数注意事项
我是先用台盼蓝染色再进行的计数,但感觉有时在镜下四个大格子中细胞分布不均匀,感觉计数结果误差可能也很大.想求教一下细胞计数时有哪些主要特别关注的点以保证计数结果的可靠性呢?

洗净计数板后,将盖玻片盖在计数板上,用移液管吸取样品,轻轻滴在盖玻片与计数板载玻片的边缘上,利用虹吸现象就好(注意要先将盖玻片盖好,再利用虹吸现象,而不是先滴加样品再盖盖玻片).然后静置,就可以在低倍镜下观察了.
2mm×2mm方格的计数
2mm×2mm表示计数室边长,即一个大方格边长.因为计数室厚度为0.1mm,所以计数区的总体积为0.4mm3.
计数室通常也有两种规格:一种是16×25型,即大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是25×16型,即大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造,它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成.
1.16×25型的计数公式为:
酵母细胞个数/1mL=100个小方格细胞总数/ 100 ×100×10000×稀释倍数
2.25×16型的计数公式为:
酵母细胞个数/1mL =80个小方格细胞总数/ 80 ×100×10000×稀释倍数
二、1mm×1mm方格的计数
1.16×25型的计数公式:
酵母细胞个数/1mL=100个小方格细胞总数/ 100 ×400×10000×稀释倍数
2.25×16型的计数公式:
酵母细胞个数/1mL=80个小方格细胞总数/ 80 ×400×10000×稀释倍数
血球汁数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重复清洗直到干净为止.

要先将盖玻片盖好,再利用虹吸现象,而不是先滴加样品再盖盖玻片