提取质粒时这样去除基因组总DNA

来源：学生作业学帮网 编辑：学帮网 时间：2024/05/07 01:35:10

提取质粒时这样去除基因组总DNA

现在质粒提取无论手提还是试剂盒,其根本原理还是碱裂解法：当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒DNA分子能够迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中；蛋白质与染色体DNA不变性 而呈絮状,离心时可沉淀下来.
这就把基因组DNA去掉了.

一般都不会有得把.如果用试剂合的话.不知道你是用什么方法来抽屉的.说清楚点

用碱裂解法提质粒，基因组DNA会与细胞残骸聚集，而小的质粒DNA溶在水相中，通过离心就能除去；如果还担心有少量基因组DNA污染，可以电泳后从胶中回收质粒片段；用核酸外切酶也能消化掉线性的DNA，而环形和超螺旋的质粒DNA则得以保留。

可以电泳后割胶纯化回收

在提取质粒中去除基因组课利用共价闭合环状质粒与线性染色体在拓扑学上的差异来分离。在碱性pH中,DNA变性，恢复中性时，线性染色体不能准确复性，与其他大分子物质一起沉淀，而质粒DNA 却可以准确复性留在上清中。

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