通过流式细胞仪检测细胞周期及凋亡时,用绿色荧光激发后药物把细胞胞浆染成红色会对PI把细胞核中DNA染成红色对检测细胞周期及凋亡结果产生影响吗?

来源:学生作业学帮网 编辑:学帮网 时间:2024/05/13 15:25:09

通过流式细胞仪检测细胞周期及凋亡时,用绿色荧光激发后药物把细胞胞浆染成红色会对PI把细胞核中DNA染成红色对检测细胞周期及凋亡结果产生影响吗?

你是用AnnxinV/PI双染来检测凋亡的吗?PBS似乎不能处理掉自发荧光的问题,你查询一下阿霉素和PI的激发波长和发射波长是否完全一致,若不一致就不会影响,但是一致的话就会有影响.但是药物染的是胞质而PI染的是细胞核,所以还是可以从形态上区分

这个要看光谱,PI一般用488激光激发,是蓝色激光。发出的荧光光谱很宽的,大部分在红色带。而且一般机器很少安装绿色激光,最多见的是蓝色和红色激光,再多会加黄色和紫外。如果你的药物发出的荧光光谱和PI的完全重合,那就要换染料染DNA, 比如DAPI,或者用Brdu来测了。我用488nm波长的激光激发,PI把细胞核染成红色,药物阿霉素把细胞质也染成红色,通过PBS能把染红的细胞质洗掉吗?因为阿霉素有自...

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这个要看光谱,PI一般用488激光激发,是蓝色激光。发出的荧光光谱很宽的,大部分在红色带。而且一般机器很少安装绿色激光,最多见的是蓝色和红色激光,再多会加黄色和紫外。如果你的药物发出的荧光光谱和PI的完全重合,那就要换染料染DNA, 比如DAPI,或者用Brdu来测了。

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