通过设计带酶切位点的PCR引物来使目的片段添加限制性酶切位点的原理是什么?百思不得其解,我的意思是说引物人为添加上的酶切位点与要扩增的片段也不匹配,怎么能随着引物克隆到目的片
来源:学生作业学帮网 编辑:学帮网 时间:2024/05/31 15:59:17
通过设计带酶切位点的PCR引物来使目的片段添加限制性酶切位点的原理是什么?百思不得其解,
我的意思是说引物人为添加上的酶切位点与要扩增的片段也不匹配,怎么能随着引物克隆到目的片段上,而使目的片段带上酶切位点的序列呢?原理是什么呢?
不是随意添加.酶切位点都加在引物的5‘端.这样在第一轮扩增后,就会产生有酶切位点的产物了(酶切位点在产物的两端).在接下来的扩增中每个产物就都会有了.PCR的时候可以耐受引物的5‘端由数个不匹配的碱基对.但是随着扩增的进行,产物都有这些位点后,就不存在不匹配的问题了
我要知道就好了
大哥 我也没想清楚,要是你知道了,跟我也说声 什么原理啊?
原理很简单,因为PCR扩增出来的产物都是你加进去的引物延伸出来的,所以PCR产物上都带你加进去的酶切位点。Btw:虽然你觉得你加进去的引物量很少,但是你可以算一下,你加进去了多少mol的引物,再用这个量乘以你的PCR目的产物的分子量,就可以知道你理论上能等到的产物的量了。所以一般pcr反应体系里加入的引物的量都是过量的。...
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原理很简单,因为PCR扩增出来的产物都是你加进去的引物延伸出来的,所以PCR产物上都带你加进去的酶切位点。Btw:虽然你觉得你加进去的引物量很少,但是你可以算一下,你加进去了多少mol的引物,再用这个量乘以你的PCR目的产物的分子量,就可以知道你理论上能等到的产物的量了。所以一般pcr反应体系里加入的引物的量都是过量的。
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通过设计带酶切位点的PCR引物来使目的片段添加限制性酶切位点的原理是什么?百思不得其解,我的意思是说引物人为添加上的酶切位点与要扩增的片段也不匹配,怎么能随着引物克隆到目的片
设计简单的引物;如何通过PCR获得目的基因
PCR的引物怎样设计,
rt pcr的引物设计
PCR中引物是和谁要互补1.PCR中引物是要和哪条链互补?是我要测目的基因的链,还是其互补链?2.设计的引物可以通过序列库查到其碱基的表达,那么过去设计引物,有很多未知的序列,过去的人怎么
设计PCR引物的主要原则是什么?
PCR引物设计应该注意的问题?
pcr引物的设计有哪些要求
pcr引物怎么设计
PCR引物设计
怎么样设计pcr引物
荧光定量PCR引物设计本人在做荧光定量PCR之前,先用Primer 3.0设计了目的基因的引物,用于半定量PCR,而且也把引物放入NCBI中进行了blast比对,得到引物为特异性引物,半定量PCR效果也跟预期一样,电
用自己设计的引物pcr目的基因的保守区,总是不成功,大概都有什么原因~
从NCBI上查找到的一个目的基因做PCR,设计引物时PCR产物长度是这个基因的全部序列吗?CAGTCTAATGATTACCGTCCTTCATACCACTTCACACCGGACCAGTACTGGATGAACGAGCCAAACGGCCTGATTAAAATCGGATCCACCTGGCACCTGTTCTTTCAACACAATCCGACGGCCAATGTATGGGGCAACA
请问PCR引物怎么设计
如何进行pcr引物设计?
PCR中引物如何设计,
巢氏PCR引物如何设计?