ISSR问题,万分感激!这个是成分分别加的,应该没有问题,之前做普通PCR都是这样的.今天我又换MIX,只加模板和引物,用五个退火温度还是一样,换了其他两种引物还是一片亮带,没有单一条带.这个

来源:学生作业学帮网 编辑:学帮网 时间:2024/04/29 18:17:11

ISSR问题,万分感激!
这个是成分分别加的,应该没有问题,之前做普通PCR都是这样的.
今天我又换MIX,只加模板和引物,用五个退火温度还是一样,换了其他两种引物还是一片亮带,没有单一条带.
这个之前没做过,是第一次做.

一片亮带说明体系工作了.你先跑个温度梯度PCR,看一下有没有合适的温度,不行就换酶,把mg离子温度增加什么的...但是你的图片就是空白的,说明你的体系根本没有工作,我是怕是因为你操作失误,少加了东西造成的,所以带做一个肯定能出来的引物,比如别人的引物,如果那个能出来就是说明你的操作没有问题.DNA没有问题.还有有时候DNA质量也是有关的.太浓了?杂蛋白太多了?都是可能的