iptg诱导过夜

IPTG诱导表达的作用原理是什么?Bindingoftherepressor-IPTGcomplextotheoperatorcanbestudiedbyusinggreaterconcentrationsoftheproteininthe

诱导大肠杆菌表达时IPTG的量50ug/ml,之前做过的我们用1mM(工作浓度)

做低温诱导需要加iptg吗需要的低温诱导可以降低IPTG的量,比如0.1mMIPTG,延长诱导时间,比如12~16小时.不加IPTG的话只有极个别情况下会出现泄漏表达.一般都是不表达的.

诱导表达时IPTG加的时间太早有影响吗?如果在菌没有进入对数期,即OD在0.4以下就加IPTG的话,对菌的生长有抑制作用.菌浓度过低,蛋白的表达量也会低,会影响到后期蛋白的检测.所以还是在菌对数期的时候加,即0.6-0.8,比较好有影响。加

BL21中的表达载体为什么要用IPTG诱导BL21细胞基因组中的T7promoter可以被IPTG诱导,诱导后其promoter下游基因产物T7RNApolymerase表达增多,T7RNApolymerase又可以将转入BL21细胞中的质

iptg诱导前后在SDS电泳结果中怎么看加入IPTG后有目标蛋白表达,正常情况下,两个泳道相比,应该能在诱导后的泳道看到有某一个比较明显的蛋白条带的增粗.这个条带的位置可以根据目标蛋白的预计分子量大小来找,当然有时候不是严格与预测分子量一致

IPTG诱导β半乳糖苷酶活性导致什么结果?答：IPTG结合并抑制lacI基因产物,即Lac阻遏蛋白

IPTG诱导BL(DE3)/BL(DE3)plysS蛋白表达的最佳温度,时间,IPTG的浓度,诱导时菌液的最佳浓度.一般是将菌摇到OD600=0.4-0.6,然后加入终浓度1mM的IPTG（这个一般不变,诱导不出来再考虑适当多加点,例如2-

IPTG诱导表达后的蛋白上样问题经过IPTG诱导完成后的大肠杆菌BL21（DE3）进行SDS-PAGE蛋白检测诱导表达效果,对菌体该如何处理?IPTG诱导后一般为胞内表达.1.检验蛋白的表达：取微量菌液,离心收获菌体,然后用PBS之类重悬,

IPTG的诱导问题我在做诱导是遇到这样一个问题,做了0小时,1,2,3,4,5小时的诱导,可是诱导的蛋白并没有随时间增加而增加,0小时没有,1,2,3,4,5的蛋白量差不多的,是不是电泳上样量有问题啊?就是加过上样缓冲液后各个样品的体积不一

IPTG的浓度换算问题生物中加样量如何计算?如诱导细菌表达时加IPTG至终浓度1mmol/L,如果菌液是5ml,那么加入IPTG的体积是5ul,那么此时IPTG配制的浓度是多少,才能这样加入正好是5ul呢?100mM/ml.240mg/ml

我用BL21（DE3）菌株表达一外源基因,用IPTG诱导,为什么我不加IPTG的对照组也会有目的蛋白的表达呢?有两种可能,一种是大肠杆菌里本身有这么大小的蛋白,不过这个可能性太小.另外一个是叫做本底表达,就是你导入后目的蛋白在未诱导情况下也

不用iptg诱导,蛋白会表达吗我做原核表达,载体为pet30a,转到BL21中,没有加入IPTG的菌液和加入IPTG的菌液跑SDS-PAGE,在预测蛋白大小处均有蛋白表达,不知道什么原因为了确定是否为我的目的蛋白,做了W-B,抗HIS标签作

蛋白表达时操作方法对结果有影响吗我做的原核表达,试过低温诱导、低浓度IPTG诱导、不同时间诱导、扩大培养加葡萄糖,但是怎么都没有结果,是因为我操作的原因吗?载体说明书上说在超声细胞破碎后要用4℃20000g离心20min,但是我每次都是把它

用不同的大肠杆菌菌株进行乳糖操纵基因的诱导表达时,对iptg的需求有何不同没什么不同的

iptg诱导完的大肠杆菌想做westernblot该如何处理菌体?需要溶菌酶吗?溶菌酶的浓度用何种容积配制?具体操作方法?最简单的办法：取200ul菌,离心去上清,在菌体里加入50ul2%SDS,再加入16ul4Xloadingbuffer

用不同的大肠杆菌菌株进行乳糖操纵基因的诱导时,iptg的需求有何不同没什么不同的

生物中加样量如何计算?如诱导细菌表达时加IPTG至终浓度1mmol/L,不知这个到底是加多少ml或ul又如洗脱柱时加0.5MNacl,这到底是加多少的呢,希望能给与详细的解答,我不懂怎么换算啊先说第一个iptg的.1mmol/L其实就是1：

我现在用大肠杆菌基因工程菌做发酵实验,每次浊度都很高,用IPTG诱导,但产生的酶活却很低~急以前做过,酶活都挺高,不知啥原因现在就是没有酶活大家以前有过这样的经历嘛,求给本人分析下原因培养基,IPTG,菌种我都验证过,应该没什么问题还会有其

使用T7启动子,BL21（DE3)菌株,加入的IPTG的终浓度要到多大才能起到诱导的作用RT最佳浓度是1mM,但是这样非常容易形成包涵体.如果包涵体可以用的话,比如做抗体,那么当然是蛋白越多越好,不过大多数时候我们需要蛋白的可溶性表达,所以